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什么是分光光度法?

发布时间:2019-10-31 11:53人气:

 
分光光度法是根据物质的吸收光语及光的收收定律,对物质进行定性、定量分析的一种方法,当光照射浴液时,当光子的能量(hv)与被照射物质的基态和激发态能量之差(DE)相等时,就能被吸收,不同物质的基态和激发态的能量之差不等,因此,吸收光子的能量也不同,即吸收光的波长不同,这就是物质对光的选择性吸收。物质选择性的吸收某种颜色的光,则呈现的是照收光的互补色。以入射光的波长(l)为横坐标,溶液的吸光度A)为纵坐标画出的曲线,即吸收光谱,吸收光语中吸光度最大的波长,为最大吸收波长,用/ms表示。
 
分光光度法测定物质含量的依据是Lambert-Beer定律(朗伯-比尔定律),即A=Kbc
 
式中,A为溶液的吸光度:c为溶液的浓度;b为液层厚度。
 
定量测定时,常用的定量方法有标准曲线法、标准对照法、比吸光系数比较法以及差示分光光度法。它们各有其适用的范围。由于许多物质在可见光区无特征吸收,而在近紫外(200~400nm)处有特征吸收,故需用紫外光为光源进行测定。

  

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